大家好，今天本篇文章就来给大家分享苯酚硫酸法，以及苯酚硫酸法测多糖含量计算公式对应的知识和见解，内容偏长哪个，大家要耐心看完哦，希望对各位有所帮助，不要忘了收藏本站喔。

1苯酚硫酸法测定葡萄糖的标准曲线,以及具体方法!

制作标准曲线：准确称取标准葡聚糖（或葡萄糖）20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.0.0.0、6及1。8ml，各以蒸馏水补至0ml，然后加入6%苯酚0ml及浓硫酸0ml。

目的要求：测量蒽酮硫酸法不能测量的血清型的过程样品中的多糖含量。

有时用多种单糖标准品作标准曲线，但不同单糖标准品在相同浓度下其吸收值相差较大（葡萄糖显色最大），分别制作标准曲线对杂多糖测定的结果也就不同。因此，苯酚硫酸法对于成分复杂的多糖来说，只能是一个参考。

糖类与硫酸加热产生糠醛或糠醛衍生物，然后用苯酚显色，由于不同糖类可以得到不同色泽，可制成对应的各类糖的标准曲线，借此可以测定样品中的糖。

浓度横坐标是指30、40、60、80（ug/ml）。

稀释倍数是指你现在多糖是0.05mg/ml，你测标取时比如你吸取0.1ml然后用水补足至1ml，然后再测吸光度，这就表示你稀释了10倍，这就是稀释倍数。

2苯酚-硫酸法的操作

苯酚-硫酸法是利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物，再以比色法测定。

目的要求：测量蒽酮硫酸法不能测量的血清型的过程样品中的多糖含量。

苯酚硫酸法测定多糖需要注意：①、试管要洗干净，苯酚硫酸法很灵敏，试管没有刷干净会有很大影响。②、操作手法一致，尤其是硫酸加入的方式和速度，要尽量一致。建议用移液管移取，直接松开按住上面的手指，让其自行流下。

在波长490nm左右处和一定浓度范围内，该衍生物的吸收值与单糖浓度呈线性关系，从而可用比色法测定其含量。若要一起加入，先配成溶液的话。要先将苯酚溶于（温）水，然后将浓硫酸绶绶倒入。切不可将溶液注入水中。

文献报道中，苯酚制剂的制备方法如下：取苯酚200g，加铝片O.2g和碳酸氢钠O.1g，蒸馏，收集182摄氏度馏分，称取20g，加入300ml蒸馏水混匀，溶解即得。置棕色瓶中，放冰箱内备用。

3苯酚硫酸法测糖是否稳定

1、较稳定。苯酚硫酸方法比较其他的测定方法灵敏度要高，但实验对苯酚的选择有要求，苯酚在常温下接触空气容易氧化，氧化后的苯酚测定糖时的值就不准确且不稳定。

2、挺好的，比硫酸蒽酮比色法效果好一些，不过也看你的样品，不同样品可能也不完全都是这样。

3、目的要求：测量蒽酮硫酸法不能测量的血清型的过程样品中的多糖含量。

4苯酚硫酸法注意事项

1、目的要求：测量蒽酮硫酸法不能测量的血清型的过程样品中的多糖含量。

2、摇匀后再加硫酸，而且是立即加。沿着管壁加，遇到过直接加试管爆裂的情况，这个可能和北方的温度也有关系。水浴之后再测定。

3、控制脱色的时间。过长的脱色时间会导致样品中的有机物质逐渐被吸附，影响到后续实验的准确性。而过短的脱色时间则无法达到理想的脱色效果。

4、反应液碱度。热源强度。煮沸时间和滴定速度。

5、可以。苯酚-硫酸法是利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，实验者需要在加入硫酸后进行摇晃，在摇晃前需要将盖子盖好，确保不会漏出，完成后再进行摇匀处理，否则就无法摇匀。

6、一些研究表明，在20℃和30℃之间，反应速率随温度的升高而增加，但是当温度超过30℃时，反应速率会逐渐减小，因此最佳温度应该在20℃到30℃之间选择。

关于苯酚硫酸法的内容到此结束，希望对大家有所帮助。